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Descriviamo un protocollo di inoculazione ritardata per generare infezioni croniche delle ferite nei topi immunocompetenti.

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Abstract Pseudomonas aeruginosa P. Vi è un'urgente necessità di modelli di infezione cronica per aiutare nello studio della patogenesi delle ferite e nello sviluppo di nuove terapie contro questo agente patogeno. Qui, descriviamo un protocollo che utilizza l'inoculazione ritardata 24 ore dopo la ferita escissionale a tutto spessore.

I dati disponibili indicano che le probabilità di successo, in termini di perdita di peso, aumentano notevolmente se geni e dieta vengono abbinati. La ricerca è stata condotta su donne in sovrappeso, alle quali è stata assegnata una dieta attinente al proprio profilo genetico. Queste donne seguite per un anno hanno perso il doppio o il triplo del peso iniziale rispetto alle altre che invece avevano seguito un regime alimentare ipocalorico non modellato sul proprio patrimonio genetico. Contatti : info obesita.

L'infezione della matrice provvisoria della ferita presente in questo momento previene la rapida staccazione o la diffusione dell'infezione e stabilisce invece un'infezione cronica della durata di giorni senza la necessità di impiantare materiali estranei o di советник на реальный счет форекс immunitaria.

Questo protocollo imita un tipico decorso temporale di infezione post-operatoria negli esseri umani. L'uso di un ceppo luminescente di P. Introduction Log in or Start trial to access full content.

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È responsabile di un'estesa morbilità e mortalità in contesti nosocomiali, in particolare per quanto riguarda le infezioni delle ferite nei pazienti immunocompromessi1,2. L'emergere di ceppi multifarmacoresistenti di questo agente patogeno ha fornito ulteriore impulso per l'indagine sui fattori che contribuiscono alla virulenza Di P. Di conseguenza, la necessità di modelli animali di infezione da ferite croniche come strumenti per studiare queste domande di ricerca non è mai stata maggiore.

Purtroppo, molti modelli animali di infezione da P. Per risolvere questo inconveniente, alcuni modelli utilizzano l'impianto di corpi estranei come tè alle erbe bruciagrassi nz di agar, impianti in silicone o gel alnati6,7,8.

Altri modelli utilizzano topi immunocompromessi a causa dell'età avanzata, dell'obesità o del diabete, o attraverso mezzi farmacologici come la neutropenia indotta da ciclofosofe9,10,11, Tuttavia, l'uso di materiali estranei o di ospiti compromessi immunitari probabilmente altera il processo infiammatorio locale, rendendo difficile comprendere la fisiopatologia coinvolta nelle infezioni croniche delle ferite negli ospiti con sistemi immunitari altrimenti normali.

Abbiamo sviluppato un modello cronico di infezione da ferita da P. L'inoculazione ritardata consente esperimenti che valutano il carico batterico che si estende ad almeno 7 giorni.

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Questo modello apre nuove opportunità per studiare sia la patogenesi che i nuovi trattamenti delle infezioni croniche di P. Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

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Protocol Log in scoperta dalla perdita di peso del ricercatore di stanford Start trial to access full content. Preparazione e crescita dei batteri Condurre tutto il lavoro con P. Eseguire tutti i passaggi qui descritti che coinvolgono P.

Il ceppo luminescente PAO1:lux di P. Coltivare a 37 gradi centigradi in un'incubatrice batterica.

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Scegli una colonia isolata e coltiva durante la notte a 37 ml in mezzo 3 ml LB, pH 7. Crescere in condizioni aerobiche tremanti.

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Autoclave tutti gli strumenti chirurgici, tra cui forbici e pinze. Utilizzare la tecnica asettica per sterilizzare gli strumenti tra gli animali. Pulire la tavola chirurgica con etanolo e preparare un campo chirurgico pulito. Gli investigatori devono seguire le linee guida del personale veterinario della loro istituzione per l'anestesia quando utilizzano l'isoflurane.

Posizionare il mouse nella camera di induzione.

Form di ricerca

Pizzica la punta del mouse per valutare la profondità dell'anestesia. Quando il mouse non risponde più alla stimolazione, rimuoverlo dalla camera di induzione e posizionarlo sul banco chirurgico con il naso nel cono naso isoflurane.

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Applicare il lubrificante oculare su entrambi gli occhi. Pesare il mouse per ottenere un peso pre-procedura linea di base.

Straditips: come riuscire a mantenere un metabolismo più attivo, efficace ed efficiente? Lo studio Un recentissimo studio condotto dalla Dott. Non si sa bene da cosa derivi questo cambiamento e i ricercatori stanno cercando di individuarne la causa. Probabilmente alla base del cambiamento ci sarebbe un ridotto tasso metabolico, dato che il corpo non si trova più a dover lavorare come era necessario nel XIX secolo, grazie allo stile di vita oggi più confortevole. Ora, dato che il nostro stile di vita non lo consente più, come possiamo riuscire a mantenere un metabolismo più attivo, efficace ed efficiente?

Posizionare il mouse in posizione prona. Rasare l'area dorsale del mouse utilizzando un rasoio elettrico.

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La rasatura deve avvenire in una posizione diversa rispetto alla stazione chirurgica per prevenire la contaminazione dei capelli della ferita. Applicare un sottile strato di lozione per la depilazione.

Dimagrire e non solo

Lascia che la lozione si sieda per s. Rimuovere i capelli e la lozione in eccesso con una garza inumidita in acqua tiepida. Dopo la depilazione, procedere alla procedura di ferita eccisionale.

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La buprenorfine a lento rilascio fornisce sollievo dal dolore oltre h. Disinfettare il sito chirurgico.

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Pulire la superficie dorsale con uno sterile tampone betadine. Pulire betadine in eccesso con un tampone di alcool sterile. Questo dovrebbe essere eseguito 3 volte alternando tra betadine e alcolswabbing muovendosi dal centro in modo circolare al bordo.

Lasciare asciugare all'aria l'area.

Account Options

Creare un drappo che circonda il sito chirurgico utilizzando garza sterile o involucro di plastica. Allungare la pelle tesa caudally. Utilizzare un punzone sterile di biopsia cutanea di 6 mm di diametro per fare un'incisione iniziale attraverso l'epidermide dorsale sinistra. Ripetere sull'epidermide dorsale destra. Utilizzare pinze per tendare la pelle scoperta dalla perdita di peso del ricercatore di stanford centro dell'area della ferita delineata a sinistra.

Da non perdere

Accise gli strati epidermici e dermici con le forbici. Ripetere sulla zona della ferita delineata a destra per creare ferite escisionali simmetriche. Lavare le ferite con 50 litri di salina sterile.

Lasciare asciugare il sito chirurgico e la pelle circostante. Quindi, coprire le ferite e il dorsum con una medicazione trasparente.

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Riposizionare il mouse in una gabbia pulita. Casa 1 animale per gabbia. Posizionare la gabbia su una piastra di riscaldamento e monitorare fino a quando il mouse si sveglia. Quando si esegue l'intervento chirurgico di cui sopra su più animali, utilizzare uno sterilizzatore di perline caldo per pulire tutti gli strumenti chirurgici tra gli animali.

Lasciare 24 h per i topi per recuperare dalla procedura chirurgica e per la formazione di una matrice provvisoria della ferita sulle ferite prima di procedere all'inoculazione con i batteri.

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